1、根據(jù)樣品類型選擇試劑盒
普通植物葉片——Plant Leaf Direct PCR Kit
多糖多酚植物葉片——Plant Leaf Direct PCR Plus Kit
普通植物中小型種子(單粒種子小于50mg)——Plant Seed Direct PCR Kit I
普通植物大型種子(單粒種子大于50mg)——Plant Seed Direct PCR Kit II
多糖多酚植物小型種子(單粒種子小于10mg)——Plant Seed Direct PCR Plus Kit I
多糖多酚植物大中型種子(單粒種子大于10mg)——Plant Seed Direct PCR Plus Kit II
2、根據(jù)是否需要防污染體系選擇試劑盒
普通PCR:普通Direct PCR試劑盒
防污染PCR:帶UNG的Direct PCR試劑盒
3、哪種PCR適合采用直接Direct PCR試劑盒
1. 單對引物
2. 擴(kuò)增片段小于1kb
3. 無保真性要求
4、如何判斷您的樣本屬于普通植物或多糖多酚植物
1. 常見普通植物:油菜(種子、葉片)、水稻(種子、葉片)、小麥(種子、葉片)、玉米(種子、葉片)、大豆(種子、葉片)。
2. 常見多糖多酚植物:擬南芥(種子、葉片)、棉花(種子、葉片)、香蕉(葉片、果肉)、桔子(果皮、葉片)、馬鈴薯(塊根)、洋
蔥(鱗葉)、蘋果(果實(shí))、蘆薈(葉片)、番茄(果實(shí))。
3. 其他植物鑒別方法:取20mg左右組織塊(或2片直徑7mm的葉片組織)放入干凈的1.5ml離心管中,加入200μl 200mM NaOH溶液,置
于95℃ 10min。裂解完后觀察其顏色變化,如果裂解產(chǎn)物顏色呈綠色或淡黃色,說明該組織多酚含量較低,如果裂解產(chǎn)物呈棕黃色或棕
紅色,說明該組織多酚含量較高。
判斷植物是否為多糖多酚樣本,裂解后顏色變化見下圖: