無(wú)RNA酶污染：試劑盒提供的DNA-Only Column使得實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)需額外添加RNA酶即可去除基因組DNA中的RNA，避免實(shí)驗(yàn)室遭受外源RNA酶污染。
速度快：Foregene Protease Plus具有比同類蛋白酶更高的活性，消化組織樣本速度快；操作簡(jiǎn)單，基因組DNA提取操作在40分鐘內(nèi)即可完成。
方 便：離心操作均在常溫，無(wú)需4℃低溫離心或乙醇沉淀DNA。
安 全：無(wú)需有機(jī)試劑抽提。
質(zhì)量高：提取獲得的基因組DNA片段大、無(wú)RNA、無(wú)RNA酶、離子含量極低，能滿足各種實(shí)驗(yàn)的要求。
產(chǎn) 品 名 稱 | 血液基因組DNA中量提取試劑盒(1-5mL) Blood DNA midi Kit |
貨 號(hào) | DE-05121 |
規(guī) 格 | 50T |
價(jià) 格 | ￥557.00 |
描 述 | 快速?gòu)目鼓獦颖局屑兓@得高質(zhì)量的基因組DNA，試劑盒包含Foregene純化柱及試劑。 |
產(chǎn)品介紹
由于血液樣本中含有大量的紅細(xì)胞以及血小板細(xì)胞等，使得血液的處理比較麻煩，而一般方法提取到的血液基因組DNA純度不高，含量太低。本試劑盒采用全新的Foregene Protease Plus以及獨(dú)特的BL1、BL2緩沖體系，可以在短時(shí)間內(nèi)完全消化抗凝血液和凝血樣本，從而最大程度上避免了DNA的降解以及獲得最大量的基因組DNA。快速的血液處理系統(tǒng)，簡(jiǎn)便的離心柱操作，大大簡(jiǎn)化了血液基因組的提取，使得40min內(nèi)即可得到高質(zhì)量、高純度的基因組DNA。
本試劑盒離心柱采用的DNA-only硅膠膜為本公司特有新型材料，高效、特異吸附DNA，可最大限度的去除RNA、雜質(zhì)蛋白、離子及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。獲得的DNA片段大，純度高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠，一個(gè)離心柱的最大承載量為80 μg DNA。獲得的DNA可用于酶切、PCR、Southern雜交、文庫(kù)構(gòu)建等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
試劑盒應(yīng)用
該試劑盒適用于新鮮或凍存的抗凝全血基因組DNA提取純化。
純化DNA的應(yīng)用
血液基因組DNA去試劑盒 純化獲得的基因組DNA純度高，可用于常規(guī)分子生物學(xué)操作，如：酶切、PCR、Southern雜交、文庫(kù)構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。
DNA提取得率和純度
血液基因組DNA提取得率與組織的來(lái)源、保存條件、保存時(shí)間、用量等因素相關(guān)，所得基因組DNA純度均滿足常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作，其OD260/280在1.7-1.9之間。
試劑盒內(nèi)容
Buffer DC：裂解血液中的紅細(xì)胞。
Buffer BL1：提供樣本酶解環(huán)境。
Foregene Protease Plus：在Buffer BL1的環(huán)境下酶解血液樣本。
Buffer BL2：失活Foregene Protease Plus，并提供DNA上柱環(huán)境。
Buffer PW：去除DNA中的蛋白質(zhì)、RNA等雜質(zhì)。
Buffer WB1：去除DNA中的殘留的鹽離子。
Buffer EB：洗脫純化柱膜上的DNA。
DNA-Only Column：特異吸附裂解產(chǎn)物中的基因組DNA。
產(chǎn)品信息
型號(hào) | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個(gè)樣品 | 制備時(shí)間 | 40-50 min (24個(gè)樣品) |
離心機(jī) | 臺(tái)式離心機(jī) | 樣本酶解物分離 | 離心分離 |
離心柱液體盛裝量 | 800 μL | 純化柱DNA承載量 | 80 μg |
洗脫體積 | 100-200 μL | 血液樣本處理量 | 1-5 mL |
操作流程
說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品文獻(xiàn)
MSDS
COA
提取過(guò)程中無(wú)法獲得基因組DNA
Answer
1. 使用凝血組織提取DNA。
建議：提取血液基因組DNA，請(qǐng)采用新鮮血液或保存的抗凝血液(最好使用EDTA作為抗凝劑)。
2. 血液用量過(guò)少可能導(dǎo)致提取不到相應(yīng)的基因組DNA。
建議：對(duì)于哺乳動(dòng)物的血液，建議使用1000 μL以上抗凝血液血液；禽類等的血液建議采用50 μL以上抗凝血液。
3. ForegeneProtease Plus保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease Plus保存條件或者更換新的Foregene Protease Plus進(jìn)行酶解反應(yīng)。
4. 試劑盒保存不當(dāng)或存放時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致試劑盒里面某些組分失效。
建議：購(gòu)置新的Blood DNA Midi Kit提取試劑盒進(jìn)行相關(guān)操作。
5. Buffer WB1沒(méi)有添加無(wú)水乙醇。
建議：確認(rèn)Buffer WB1中添加正確體積的無(wú)水乙醇。
6. 洗脫液沒(méi)有正確滴加到硅膠膜上。
建議：將65℃預(yù)熱的洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
提取獲得低產(chǎn)量基因組DNA
Answer
1. 血液保存不當(dāng)或保存時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致基因組DNA降解。
建議：盡量使用新近采集血液進(jìn)行基因組DNA的提取。
2. 樣本用量過(guò)少，提取到的基因組DNA含量會(huì)較少。
建議：哺乳類動(dòng)物的血液中含基因組DNA的細(xì)胞較少，若需更多的基因組DNA，建議使用1000μl以上的抗凝血進(jìn)行基因組DNA提取。
3. 肝素抗凝血液沒(méi)有進(jìn)行Buffer DC處理。
建議：肝素本身會(huì)對(duì)DNA的提取有影響，在進(jìn)行肝素抗凝血基因組DNA提取時(shí)，請(qǐng)務(wù)必按操作說(shuō)明進(jìn)行Buffer DC預(yù)處理。
4. ForegeneProtease Plus保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease Plus保存條件或者更換新的ForegeneProtease Plus進(jìn)行酶解反應(yīng)。
5. 洗脫液?jiǎn)栴}。
建議：請(qǐng)使用Buffer EB進(jìn)行洗脫；如果使用ddH2O或其他洗脫液，確認(rèn)洗脫液的pH值在7.0-8.5之間。
6. 洗脫液沒(méi)有正確滴加。
建議：請(qǐng)將洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
7. 洗脫液體積太少。
建議：請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)上要求使用洗脫液進(jìn)行基因組DNA洗脫，最少不要低于100 μL。
提取獲得基因組DNA純度低
Answer
基因組DNA純度低會(huì)導(dǎo)致下游實(shí)驗(yàn)的失敗或效果不理想，如：酶切不開(kāi)，PCR得不到目的基因片段等。
1. 雜蛋白污染、RNA污染。
分析：沒(méi)有使用Buffer PW洗滌純化柱；Buffer PW洗滌純化柱沒(méi)有使用正確的離心轉(zhuǎn)速。
建議：在上清液過(guò)柱時(shí)盡量保證上清液中無(wú)沉淀；務(wù)必按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
2. 雜質(zhì)離子污染。
分析：省略了Buffer WB1洗滌純化柱或者只洗滌了一次，導(dǎo)致殘留的離子污染。
建議：務(wù)必按說(shuō)明書(shū)使用Buffer WB1洗滌2次，以盡量去除殘留的離子。
3. RNA酶污染。
分析：Buffer中添加了外源的RNA酶；BufferPW洗滌操作不正確，導(dǎo)致RNA酶殘留，影響下游RNA實(shí)驗(yàn)操作，如：體外轉(zhuǎn)錄等。
建議：Foregene系列核酸提取試劑盒無(wú)需額外添加RNA酶即可去除RNA，Blood DNA Midi Kit里面所有試劑均無(wú)需添加RNA酶；務(wù)必按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
4. 乙醇?xì)埩簟?/span>
分析：Buffer WB1洗滌純化柱后，沒(méi)有進(jìn)行空管離心操作。
建議：按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行正確的空管離心操作。
