產(chǎn) 品 名 稱 | PCR產(chǎn)物純化試劑盒 PCR Purification Kit |
貨 號(hào) | DE-03011 |
規(guī) 格 | 50T |
價(jià) 格 | ￥232.00 |
描 述 | 該試劑盒適用于回收PCR產(chǎn)物中DNA片段(60bp-10kb)。 |
產(chǎn)品介紹
該試劑盒采用本公司研制的離心柱和配方，可以從PCR體系中高效率的回收高純度DNA片段。該純化柱能高效的結(jié)合DNA，搭配獨(dú)特的配方試劑使得不經(jīng)過膠回收便可直接去除引物二聚體。
試劑盒回收DNA片段范圍廣，一般條件下可以回收短至60bp的DNA片段。最小可以使用30μl洗脫液，提高回收DNA濃度。
試劑盒操作便捷，步驟少，只需數(shù)次離心即可同時(shí)處理多個(gè)樣品，15分鐘即可獲得高純回收DNA片段。
試劑盒應(yīng)用
該試劑盒適用于回收PCR產(chǎn)物中DNA片段(60bp-10kb)。
回收DNA片段的應(yīng)用
PCR產(chǎn)物純化試劑盒回收獲得的DNA片段純度高，可用于常規(guī)分子生物學(xué)操作，如：酶切、連接、PCR、測序等實(shí)驗(yàn)。
DNA回收率
鑒于純化柱的特性，對于不同片段的DNA其吸附能力以及洗脫效率也不一樣，因此DNA回收的效率會(huì)有所不同。下圖為從PCR體系中回收225bp DNA片段對比：
試劑盒內(nèi)容
Buffer BD：調(diào)節(jié)PCR產(chǎn)物體系，使DNA片段能更好的結(jié)合到硅膠膜上。
Buffer BD-S：補(bǔ)充調(diào)節(jié)PCR產(chǎn)物體系。
Buffer WB1：去除DNA中的殘留的鹽離子。
Buffer EB：洗脫純化柱膜上的DNA。
DNA-Only Column：特異吸附混合體系中的基因組DNA。
產(chǎn)品信息
型號(hào) | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個(gè)樣品 | 制備時(shí)間 | ~15 min(24個(gè)樣品) |
離心機(jī) | 臺(tái)式離心機(jī) | 純化柱DNA承載量 | 80 μg |
離心柱液體盛裝量 | 800 μL | 最小洗脫體積 | 30 μL |
PCR體系 | 50 μL / Prep | 回收效率* | 80-95% |
操作流程
說明書
產(chǎn)品文獻(xiàn)
Association between inflammatory-response gene polymorphisms and risk of acute kidney injury in children
Jing He, Guoyan Xie, Hui Wu, Song Xu, Jun Xie, Youyuan Chen, Xinqian Zhao
貴州省畢節(jié)第一人民醫(yī)院兒科
Bioscience Reports ( IF 2.899 ) Pub Date : 2018-12 , DOI: 10.1042/BSR20180537
文章鏈接：http://www.bioscirep.org/content/38/6/BSR20180537
MSDS
COA
回收不到DNA片段或回收效率低
Answer
通常會(huì)有多種因素影響PCR產(chǎn)物回收效率，比如：PCR體系本身DNA含量、洗脫體積等。
1. PCR體系中沒有目的條帶。
建議：確認(rèn)用于回收的PCR體系中有特異的目的條帶(如果不能確定PCR體系中是否含有目的條帶，可以取少量PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析)。
2. BufferBD加入比例不合適或沒有加異丙醇。
建議：參照試劑瓶上的標(biāo)簽所示的體積加入相應(yīng)的異丙醇，且操作過程中按照操作說明在PCR產(chǎn)物體系中添加正確體積比例的Buffer BD，并充分混勻。
3. DNA片段≥2kb時(shí)回收率較低。
建議：按照操作說明書中步驟，在PCR產(chǎn)物體系中添加正確體積的Buffer BD-S。
4. BufferWB1中忘記添加無水乙醇。
建議：參照說明書或試劑瓶上標(biāo)簽在Buffer WB1中添加正確體積的無水乙醇并混勻。
5. 洗脫液添加不正確。
建議：確認(rèn)Buffer EB或ddH2O滴加到了純化柱膜中間位置；尤其是進(jìn)行小體積洗脫的時(shí)候，一定要確定洗脫液滴加的位置正確，否則會(huì)導(dǎo)致無法回收到DNA。
6. 洗脫液使用不正確。
建議：有些特殊需求的實(shí)驗(yàn)需要使用純水洗脫，請確定洗脫液的pH在7.0-8.5之間，否則將很大程度上影響洗脫效率。
回收的DNA影響下游實(shí)驗(yàn)
Answer
1. 洗脫下來的DNA片段中鹽離子濃度過高。
建議：結(jié)合DNA片段的純化柱在加入700μL Buffer WB1后，在室溫放置5min再離心，以便能徹底的去除鹽離子。
2. 洗脫下來的DNA片段中含有乙醇?xì)埩簟?/span>
建議：Buffer WB1洗滌純化柱后，12,000rpm (~13,400×g )空管離心2min一定不能省略；如果還有乙醇?xì)埩艨梢詫⒓兓谑覝胤胖?/span>2-5min再進(jìn)行洗脫或者以13,400rpm (~17,000×g )離心2min。
