產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品采用獨(dú)特的裂解緩沖液體系可以快速的從小鼠鼠尾、鼠耳、肌肉等組織樣本中釋放出基因組DNA，用于PCR反應(yīng)，因此特別適合大規(guī)?；驒z測(cè)。

裂解緩沖液釋放基因組DNA過程在65℃條件下10-30 min內(nèi)完成，不需要其他去蛋白、RNA等的過程，即可將釋放出的微量DNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)。

2×Mouse Direct PCR Mix(HS)-UNG (dye)具有很強(qiáng)的PCR反應(yīng)抑制物耐受性，能以待測(cè)樣本的裂解液為模板，進(jìn)行高效特異性擴(kuò)增。該試劑包含專門用于 Direct PCR 的熱啟動(dòng) Taq 酶（Direct HS-Taq），與裂解緩沖液配合使用能夠快速簡(jiǎn)便地對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，并具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。

2× Mouse Direct PCR Mix(HS)-UNG (dye)用dUTP替代了dTTP，并同時(shí)加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反應(yīng)前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，UNG酶對(duì)不含有尿嘧啶的模板不會(huì)造成任何影響，從而保證擴(kuò)增的特異性和準(zhǔn)確性，防止了大規(guī)?；驒z測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)的PCR產(chǎn)物污染問題。

試劑盒應(yīng)用

適用范圍：小鼠鼠尾、鼠耳、肌肉等組織。

樣本裂解釋放的DNA：僅用作PCR模板。

試劑盒可用于以下用途：轉(zhuǎn)基因型鑒定、動(dòng)物基因分型等。

試劑盒局限性

擴(kuò)增片段≤1kb；超過1kb，擴(kuò)增效率下降或者擴(kuò)增失敗。

UNG防PCR產(chǎn)物污染體系得到的PCR產(chǎn)物請(qǐng)勿用于基因克隆。

PCR產(chǎn)物3’末端隨機(jī)加A尾。

試劑盒內(nèi)容

Buffer MP：提供小鼠組織裂解反應(yīng)所需的環(huán)境。

Foregene Protease Plus：在裂解緩沖液的環(huán)境下，裂解鼠尾或小鼠組織，釋放基因組DNA。

2× Mouse Direct PCR Mix(HS)-UNG (dye)：用dUTP替代了dTTP，并同時(shí)加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶，從而能夠有效防止PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染。包含福際生物特別改造的HS-Taq DNA Polymerase、UDG、dNTPs、MgCl₂、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR反應(yīng)時(shí)，只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物?/span>ddH₂O添加到2× Mouse Direct PCR Mix(HS)-UNG (dye)中即可用于PCR反應(yīng)。

6× DNA Loading Buffer：該Loading Buffer中不含有SDS。建議在進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，配搭使用試劑盒附贈(zèng)的6× DNA Loading Buffer，以便取得好的電泳結(jié)果。切勿使用含有SDS的Loading Buffer，否則在電泳時(shí)會(huì)在泳道中有一大團(tuán)拖尾亮光，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

儲(chǔ)存條件

全程低溫冰盒運(yùn)輸，保證試劑盒Part I、Part II處于＜4℃狀態(tài)。

本試劑盒Part I保存在2-8℃。

v 試劑Buffer MP，在干燥條件下，可保存12個(gè)月；如需保存更長(zhǎng)時(shí)間可置于2–8℃。

v  試劑Foregene Protease Plus，具有獨(dú)特配方，為保證其活性和穩(wěn)定性，請(qǐng)保存于4℃，保存時(shí)間為12個(gè)月。

v  試劑6× DNA Loading Buffer，可置于4℃或-20℃長(zhǎng)期保存。

本試劑盒Part II保存在-20℃。

v  試劑2× Mouse Direct PCR Mix(HS)-UNG (dye)，在-20℃條件下可保存12個(gè)月；若頻繁使用，也可置于4℃短期保存(限10天內(nèi)用完)。

操作流程