產(chǎn) 品 名 稱 | 動物組織總RNA提取試劑盒 Animal Total RNA Isolation Kit | |
貨 號 | RE-03011 | RE-03014 |
規(guī) 格 | 50T | 200T |
價 格 | ￥652.00 | ￥2,227.00 |
描 述 | 快速從多種動物組織、培養(yǎng)細胞中純化高質(zhì)量總RNA，試劑盒包含Foregene純化柱及試劑。 | |
產(chǎn)品介紹
該試劑盒采用第三代RNA提取技術(shù)，可以從各種動物組織中高效率的提取得到高純度高質(zhì)量的總 RNA。提供高效的 DNA-Cleaning Colunm，能輕松的讓上清液和組織裂解物分離并吸附除去基因組 DNA，操作簡便、省時；該 RNA-only Column 能高效的結(jié)合 RNA，搭配獨特的配方，可以同時處理大量樣品。
全體系 RNase-Free，使得提取的 RNA無降解；Buffer RW1、Buffer RW2 緩沖液洗滌體系，使得獲得的 RNA 無蛋白、無 DNA、無離子、無有機化合物污染。
試劑盒應(yīng)用
該試劑盒適用于多種新鮮或凍存的動物組織或培養(yǎng)細胞總RNA提取純化。
純化RNA的應(yīng)用
動物組織總RNA提取試劑盒提取得到的總RNA可用于各種下游分子實驗，例如：cDNA合成，RT-PCR、Real Time PCR、Northern Blot、Dot Blot、體外翻譯、芯片分析、PolyA篩選、分子克隆和RNase保護分析等。
RNA提取得率和純度
使用動物組織總RNA提取試劑盒純化得到的RNA，其產(chǎn)量與組織初始量、組織新鮮程度、組織保存時間以及操作相關(guān)。以下是使用該試劑盒提取RNA，各種組織其RNA得率與純度，實際操作中，可能與該數(shù)據(jù)有些許出入。
組織類型 | 總RNA產(chǎn)量(μg) | OD260/280 | OD260/230 |
心 | 5-20 μg/10mg組織 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
肝 | 40-60 μg/10mg組織 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
脾 | 30-50 μg/10mg組織 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
腎 | 25-35 μg/10mg組織 | 1.8-2.1 | 1.7-2.0 |
腦 | 3-10 μg/10mg組織 | 1.8-2.1 | 1.5-1.7 |
細胞 | 10-30 μg/106細胞 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
儲存條件
常溫(15–25℃)，有效期為 24個月。
試劑盒內(nèi)容
Buffer RL1：提供動物組織研磨裂解所需的環(huán)境。
Buffer RL2：提供 RNA 的特異上柱環(huán)境。
Buffer RW1：去除 RNA 中的蛋白質(zhì)、DNA 等雜質(zhì)。
Buffer RW2：去除 RNA 中殘留的鹽離子。
RNase-Free ddH2O：洗脫純化柱膜上的總 RNA。
DNA-Cleaning Column：特異吸附組織裂解產(chǎn)物中的 DNA，并過濾除去裂解產(chǎn)物 中的固體雜質(zhì)。
RNA-only Column：特異吸附上通過 DNA-Cleaning Column 濾液中的總 RNA。
產(chǎn)品信息
型號 | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個樣品 | 制備時間 | ~20min(24個樣品) |
離心機 | 臺式離心機 | 組織裂解物分離 | 離心分離 |
純化柱RNA承載量 | 160 μg | 離心柱液體盛裝量 | 800 μL |
洗脫體積 | 50-200 μL | 組織樣本處理量 | 組織：10-20mg、細胞：(1-5)×106 |
操作流程
說明書
產(chǎn)品文獻
TheAttenuation of Trophoblast Invasion Caused by the Downregulation of EZH2 IsInvolved in the Pathogenesis of Human Recurrent Miscarriage
Shijian Lv, Na Wang, Hong Lv,Jieqiong Yang, Jianwei Liu, Wei-Ping Li, Cong Zhang, Zi-Jiang Chen
上海市輔助生殖與生殖遺傳學(xué)重點實驗室
MolecularTherapy-Nucleic Acids ( IF 5.66 ) PubDate : 2018-12-21, DOI：10.4454/jpp.v98i3.3764
文章鏈接：https://www.cell.com/molecular-therapy-family/nucleic-acids/fulltext/S2162-2531(18)30326-3#
Dysfunction ofDNA damage-inducible transcript 4 in the decidua is relevant to thepathogenesis of preeclampsia
Jieqiong Yang, Yachao Zhang, JingTong, Hong Lv, Cong Zhang, Zi-Jiang Chen
Biology ofReproduction ( IF 3.184 ) PubDate : 2018-02-13 , DOI：10.1093/biolre/ioy038
上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院仁濟醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心
輔助生殖與生殖遺傳學(xué)重點實驗室
文章鏈接：https://academic.oup.com/biolreprod/article-abstract/98/6/821/4855937?redirectedFrom=fulltext
Chitosan-DNA nanoparticles enhanced the immunogenicity ofmultivalent DNA vaccination on mice against Trueperella pyogenes infection
Ting Huang, Xuhao Song, Jie Jing, KeleiZhao, Yongmei Shen,Xiuyue Zhang and Bisong Yue Contributed equally
四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物資源與生態(tài)環(huán)境教育部重點實驗室
Journal of Nanobiotechnology ( IF 5.294 ) PubDate : 2018-01-29 , DOI：10.1186/s12951-018-0337-2
文章鏈接：https://link.springer.com/article/10.1186/s12951-018-0337-2
Downregulation of decidual SP1 and P300 is associated withsevere preeclampsia
Yachao Zhang, Jieqiong Yang, Shijian Lv1, Dong-Qin Zhao,Zi-Jiang Chen, Wei-Ping Li and Cong Zhang
上海市輔助生殖與生殖遺傳學(xué)重點實驗室山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
山東省動物耐藥生物學(xué)重點實驗室
Journal of Molecular Endocrinology ( IF 3.297 ) PubDate : 2018, DOI：10.1530/JME-17-0180
文章鏈接: http://europepmc.org/abstract/MED/29273682
BMAL1 facilitates trophoblast migration and invasion viaSP1-DNMT1/DAB2IP pathway in recurrent spontaneous abortion
Shang Li, Junyu Zhai, Jiansheng Liu, Yan Hong, Weixiu Zhao,Aimin Zhao, Kang Sun, Yanzhi Du, Zi-Jiang Chen
上海市輔助生殖與生殖遺傳學(xué)重點實驗室
Oncotarget ( IF 5.168 ) PubDate : 2017-09-01, DOI：10.18632/oncotarget.20702
文章鏈接: http://www.oncotarget.com/index.php?journal=oncotarget&page=article&op=view&path%5B%5D=20702&path%5B%5D=65952
Zinc finger gene 217 (ZNF217) Promoted OvarianHyperstimulation Syndrome (OHSS) through Regulating E2 Synthesis and InhibitingThrombospondin-1 (TSP-1)
Junyu Zhai, Jiansheng Liu, Xiaoyue Cheng, Shang Li, YanHong, Kang Sun, Zi-Jiang Chen, Yanzhi Du & Weiping Li
上海市輔助生殖與生殖遺傳學(xué)重點實驗室
Scientific Reports ( IF 4.259 ) PubDate : 2017-06-12, DOI：10.1038/s41598-017-03555-6
文章鏈接：https://www.nature.com/articles/s41598-017-03555-6
Regulatory network of GATA3 in pediatric acutelymphoblastic leukemia
Qianqian Hou, Fei Liao, Shouyue Zhang, Duyu Zhang, YanZhang, Xueyan Zhou, Xuyang Xia, Yuanxin Ye, Hanshuo Yang, Zhaozhi Li, LeimingWang, Xi Wang, Zhigui Ma, Yiping Zhu, Liang Ouyang, Yuelan Wang, Hui Zhang, LiYang,Heng Xu, Yang Shu
四川大學(xué)華西醫(yī)院精準醫(yī)療中心
四川省精準醫(yī)療重點實驗室四川省生物治療國家重點實驗室
Oncotarget ( IF 5.168 ) PubDate : 2017-03-21, DOI：10.18632/oncotarget.16424
Effects of BMAL1–SIRT1-positive cycle on estrogen synthesisin human ovarian granulosa cells: an implicative role of BMAL1 in PCOS
Jiaou Zhang, Jiansheng Liu, Kai Zhu, Yan Hong, Yun Sun.Xiaoming Zhao. Yanzhi DuZi-Jiang Chen
Endocrine ( IF 3.279 ) PubDate : 2016-08-27 , DOI：10.1007/s12020-016-0961-2
上海市輔助生殖與生殖遺傳學(xué)重點實驗室
文章鏈接：https://link.springer.com/article/10.1007/s12020-016-0961-2
Dysfunction of Liver Receptor Homolog-1 in Decidua:Possible Relevance to the Pathogenesis of Preeclampsia
Dongmei Zhang, Dong Cheng, Tao Liu, Yachao Zhang, Zi-JiangChen, Cong Zhang
上海市輔助生殖與生殖遺傳學(xué)重點實驗室
山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院動物耐藥性研究重點實驗室
Plos One ( IF 3.234 ) PubDate: 2015-12-30, DOI：10.1371/journal.pone.0145968
文章鏈接：https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0145968
MSDS
COA
提取不到RNA或者RNA產(chǎn)量低
Answer
通常會有多種因素影響回收效率，比如：組織樣本RNA含量、操作方法、洗脫體積等。
1. 操作過程中進行了冰浴或低溫(4°C)離心。
建議：全程常溫(15-25°C)操作，切勿冰浴和低溫離心。
2. 樣本保存不當或樣本保存時間過久。
建議：樣本保存于-80℃或凍存于液氮中，并避免反復(fù)凍融使用；盡量采用新鮮組織或培養(yǎng)的細胞進行RNA提取操作。
3. 樣本裂解不充分。
建議：在組織勻漿時，請保證組織充分勻漿，組織細胞都被充分裂解釋放RNA。
4. 洗脫液添加不正確。
建議：確認RNase-Free ddH2O滴加到了純化柱膜中間位置。
5. Buffer RL2或Buffer RW2中沒有添加正確體積的無水乙醇。
建議：請按照說明書，在試劑盒使用前，Buffer RL2和Buffer RW2中添加正確體積的無水乙醇并混勻。
6. 組織樣本用量不合適。
建議：每500μl Buffer RL1使用組織量10-20mg或(1-5)×106個細胞，組織使用過多會導(dǎo)致RNA提取量降低。
7. 洗脫體積不合適或洗脫不徹底。
建議：純化柱的洗脫液體積為50-200μl；若洗脫效果并不理想，建議在加入預(yù)熱的RNase-Free ddH2O后，延長室溫放置的時間，例如放置5-10min。
8. 純化柱在Buffer RW2洗滌之后有乙醇殘留。
建議：如果在Buffer RW2洗滌，空管離心1min后還有乙醇殘留，可以將空管離心操作的時間增加至2min，或?qū)⒓兓糜谑覝?/span>5min，以充分除去殘留乙醇。
純化獲得的RNA有降解
Answer
純化得到的RNA的質(zhì)量和樣本的保存、RNase污染、操作等因素有關(guān)。
1. 組織樣本沒有及時保存。
建議：組織樣本或者細胞在收集后若不及時使用，請立即低溫保存于-80℃或者液氮中。提取RNA請盡量使用新近采取的組織或細胞樣本。
2. 組織樣本反復(fù)凍融。
建議：組織樣本保存時，最好切成小塊保存，使用時取出其中一塊即可，避免樣本的反復(fù)凍融導(dǎo)致RNA的降解。
3. 操作間有RNase引入或沒有佩戴一次性手套、口罩等。
建議：RNA提取實驗最好在單獨的RNA操作間進行，并在實驗前清理好實驗桌，實驗時佩戴一次性手套、口罩，最大程度上避免RNase引入導(dǎo)致的RNA降解。
4. 試劑在使用過程中被RNase污染。
建議：更換新的Animal Total RNAIsolation Kit進行相關(guān)實驗。
5. RNA操作時所用的離心管、槍頭等有RNase污染。
建議：確認RNA提取時所用到的離心管、槍頭、移液器等都是RNase-Free。
純化獲得的RNA影響下游實驗
Answer
經(jīng)純化柱純化的RNA，如果鹽離子、蛋白質(zhì)含量過多會影響下游實驗，比如：逆轉(zhuǎn)錄、Northern Blot等。
1. 洗脫后的RNA有鹽離子殘留。
建議：確認Buffer RW2中添加了正確體積的乙醇，并按操作說明的離心轉(zhuǎn)速進行2次純化柱洗滌；如果還有鹽離子殘留，可在純化柱加入Buffer RW2后，室溫放置5min，再進行離心操作，以最大程度上去除鹽離子污染。
2. 洗脫后的RNA有乙醇殘留。
建議：確認Buffer RW2洗滌后，按操作說明的離心轉(zhuǎn)速進行空管離心操作；如果還有乙醇殘留，可以將空管離心操作的時間增加至2min，或者在空管離心后在室溫放置5min，以最大程度上去除乙醇殘留。
