產(chǎn) 品 名 稱 | 病毒RNA提取試劑盒 Viral RNA Isolation Kit | |
貨 號 | RE-02011 | RE-02014 |
規(guī) 格 | 50T | 200T |
價 格 | ￥905.00 | ￥3,054.00 |
描 述 | 快速從血漿、血清、無細胞體液和細胞培養(yǎng)上清液等樣品中高效率分離純化病毒的RNA 試劑盒包含Foregene純化柱及試劑。 | |
產(chǎn)品介紹
該試劑盒采用本公司研制的離心柱和配方，可以從口腔拭子、血漿、血清、無細胞體液和細胞培養(yǎng)上清液等樣品中高效率分離純化病毒的RNA。試劑盒特別加入了Linear Acrylamide，可以從體系中輕松捕獲微量RNA，具有方便快捷、產(chǎn)量高、重復(fù)性好的特點。RNA-Only Column能高效的結(jié)合RNA，搭配獨特的配方，可以同時處理大量樣品。
全體系RNase-Free，使得純化得到的病毒RNA無降解；Buffer viRW1、Buffer viRW2緩沖液洗滌體系，使得獲得的病毒RNA無蛋白、核酸酶或其它雜質(zhì)的污染，可直接用于下游分子生物學(xué)實驗。
試劑盒應(yīng)用
該試劑盒適用于血漿、血清、無細胞體液和細胞培養(yǎng)上清液等樣品中病毒RNA提取純化。
純化RNA的應(yīng)用
病毒RNA提取試劑盒純化得到的病毒RNA可用于各種下游分子實驗，例如： RT-PCR、Real Time PCR、Northern Blot、芯片分析、分子克隆等。
RNA提取得率和純度
使用病毒RNA提取試劑盒可以從口腔拭子、血漿、血清、無細胞體液和細胞培養(yǎng)上清液等樣品中純化得到的病毒RNA，其產(chǎn)量與樣本本身、樣本初始量、樣本新鮮程度、樣本保存時間以及操作相關(guān)。純化得到的RNA，其OD260/280=1.8-2.1。
儲存條件
常溫(15–25℃)，有效期為 24個月。
試劑盒內(nèi)容
Linear Acrylamide：降低純化柱的本底吸附，輕松捕獲體系中的微量RNA。
Buffer viRL：提供樣本裂解所需的環(huán)境以及過柱環(huán)境。
Buffer viRW1：去除RNA中的蛋白質(zhì)、DNA等雜質(zhì)。
Buffer viRW2：去除RNA中殘留的鹽離子。
RNase-Free ddH2O：洗脫純化柱膜上的病毒RNA。
RNA-only Column：特異吸附RNA片段。
產(chǎn)品信息
型號 | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個樣品 | 制備時間 | ~30 min (24個樣品) |
離心機 | 臺式離心機 | 離心柱液體盛裝量 | 800 μL |
純化柱RNA承載量 | 20 μg | 單次樣本處理量 | ≤200 μL |
洗脫體積 | 30-50 μL | 組織樣本處理量 | ≥80%回收效率 |
操作流程
說明書
產(chǎn)品文獻
MSDS
COA
提取不到RNA或者RNA產(chǎn)量低
Answer
通常會有多種因素影響回收效率，比如：樣本RNA含量、操作方法、洗脫體積等。
常見原因分析：
1. 操作過程中進行了冰浴或低溫(4°C)離心。
建議：全程常溫(15-25°C)操作，切勿冰浴和低溫離心。
2. 樣品保存不當或樣本保存時間過久。
建議：樣本保存于-80℃或凍存于液氮中，并避免反復(fù)凍融使用；盡量采用新鮮采集樣品進行RNA提取操作。
3. 樣品裂解不充分。
建議：請保證樣品和Linear Acrylamide工作液徹底混勻，并且在室溫(15-25℃)孵育10min。
4. 洗脫液添加不正確。
建議：確認RNase-Free ddH2O滴加到了純化柱膜中間位置。
5. Buffer viRW2中沒有添加正確體積的無水乙醇。
建議：請按照說明書，在試劑盒使用前，Buffer viRW2中添加正確體積的無水乙醇并混勻。
6. 樣品用量不合適。
建議：每500μl BufferviRL處理樣品量200μl，樣品處理量過多會導(dǎo)致RNA提取量降低。
7. 洗脫體積不合適或洗脫不徹底。
建議：純化柱的洗脫液體積為30-50μl；若洗脫效果并不理想，建議在加入預(yù)熱的RNase-Free ddH2O后，延長室溫放置的時間，例如放置5-10min。
8. 純化柱在Buffer viRW2洗滌之后有乙醇殘留。
建議：如果在Buffer viRW2洗滌，空管離心2min后還有乙醇殘留，可以在空管離心后將純化柱置于室溫5min，以充分除去殘留乙醇。
純化獲得的RNA有降解
Answer
純化得到的RNA的質(zhì)量和樣品的保存、RNase污染、操作等因素有關(guān)。
常見原因分析：
1. 采集樣品沒有及時保存。
建議：樣品在采集后若不及時使用，請立即低溫保存于-80℃或者液氮中。提取RNA請盡量使用新近采集的樣品。
2. 采集樣品反復(fù)凍融。
建議：采集樣品保存過程中要避免凍融(不超過一次)，否則會導(dǎo)致核酸得率降低。
3. 操作間有RNase引入或沒有佩戴一次性手套、口罩等。
建議：RNA提取實驗最好在單獨的RNA操作間進行，并在實驗前清理好實驗桌，實驗時佩戴一次性手套、口罩，最大程度上避免RNase引入導(dǎo)致的RNA降解。
4. 試劑在使用過程中被RNase污染。
建議：更換新的Viral RNA Isolation Kit進行相關(guān)實驗。
5. RNA操作時所用的離心管、槍頭等有RNase污染。
建議：確認RNA提取時所用到的離心管、槍頭、移液器等都是RNase-Free。
純化獲得的RNA影響下游實驗
Answer
經(jīng)純化柱純化的RNA，如果鹽離子、蛋白質(zhì)含量過多會影響下游實驗，比如：逆轉(zhuǎn)錄、Northern Blot等。
1. 洗脫后的RNA有鹽離子殘留。
建議：確認Buffer viRW2中添加了正確體積的無水乙醇，并按操作說明的離心轉(zhuǎn)速進行2次純化柱洗滌；如果還有鹽離子殘留，可在純化柱加入Buffer viRW2后，室溫放置5min，再進行離心操作，以最大程度上去除鹽離子污染。
2. 洗脫后的RNA有乙醇殘留。
建議：確認Buffer viRW2洗滌后，按操作說明的離心轉(zhuǎn)速進行空管離心操作；如果還有乙醇殘留，可以在空管離心后再室溫放置5min，以最大程度上去除乙醇殘留。
