無(wú)RNA酶污染：試劑盒提供的DNA-Only Column使得實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)需額外添加RNA酶即可去除基因組DNA中的RNA，避免實(shí)驗(yàn)室遭受外源RNA酶污染。
速度快：Foregene Protease具有比同類蛋白酶更高的活性，消化組織樣本速度快；操作簡(jiǎn)單，基因組DNA提取操作在30分鐘內(nèi)即可完成。
方 便：離心操作均在常溫，無(wú)需4℃低溫離心或乙醇沉淀DNA。
安 全：無(wú)需有機(jī)試劑抽提。
質(zhì)量高：提取獲得的基因組DNA片段大、無(wú)RNA、無(wú)RNA酶、離子含量極低，能滿足各種實(shí)驗(yàn)的要求。
產(chǎn) 品 名 稱 | 植物基因組DNA提取試劑盒 Plant DNA Isolation Kit |
貨 號(hào) | DE-06111 |
規(guī) 格 | 50T |
價(jià) 格 | ￥436.00 |
描 述 | 快速?gòu)闹参飿颖荆òǘ嗵嵌喾又参飿颖荆┲屑兓@得高質(zhì)量的基因組DNA。 |
產(chǎn)品介紹
本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的DNA-Only Column、全新的Foregene Protease以及獨(dú)特的緩沖體系，大大簡(jiǎn)化了植物基因組DNA提取步驟，在30分鐘內(nèi)可獲得高純度基因組DNA，極大程度上避免了基因組DNA的降解。
離心柱中的DNA-Only硅膠膜可高效、特異吸附DNA，無(wú)需添加任何有機(jī)試劑即可最大限度的去除RNA、雜質(zhì)蛋白、離子及多糖、多酚等有機(jī)化合物。獲得的DNA片段大，純度高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠。
試劑盒應(yīng)用
該試劑盒適用于新鮮或凍存的植物組織基因組DNA提取純化。
純化DNA的應(yīng)用
植物基因組DNA提取試劑盒純化獲得的基因組DNA純度高，可用于常規(guī)分子生物學(xué)操作，如：酶切、PCR、Southern雜交、文庫(kù)構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。
DNA提取得率和純度
提取獲得的植物基因組DNA量與植物樣本的來(lái)源、樣本的新鮮程度、保存條件、水分含量等因素相關(guān)。使用PlantDNA Isolation Kit處理各種來(lái)源植物新鮮葉片樣本，獲得的基因組DNA量和純度見(jiàn)下表：
新鮮幼嫩葉片 | 樣本用量(mg) | DNA產(chǎn)量(μg) | OD260/280 |
玉米 | 100 | 4-7 | 1.7-1.9 |
大豆 | 100 | 5-7 | 1.7-1.9 |
小麥 | 100 | 10-14 | 1.7-1.9 |
棉花 | 100 | 3-5 | 1.7-1.9 |
水稻 | 100 | 4-6 | 1.7-1.9 |
煙草 | 100 | 5-7 | 1.7-1.9 |
油菜 | 100 | 2-3 | 1.7-1.9 |
注意：此表數(shù)據(jù)僅作參考，實(shí)際操作中由于所用材料的存儲(chǔ)條件、操作熟練度等因素影響，所得數(shù)據(jù)會(huì)與此表數(shù)據(jù)有些許出入。
試劑盒內(nèi)容
Buffer PL1：提供植物組織裂解環(huán)境。
Foregene Protease：在Buffer PL1的環(huán)境下酶解植物組織中的蛋白質(zhì)。
Buffer PL2：失活Foregene Protease，并提供DNA上柱環(huán)境。
Buffer PW：去除DNA中的蛋白質(zhì)、RNA等雜質(zhì)。
Buffer WB：去除DNA中的殘留的鹽離子。
Buffer EB：洗脫純化柱膜上的DNA。
DNA-only Column：特異吸附裂解產(chǎn)物中的基因組DNA。
產(chǎn)品信息
型號(hào) | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個(gè)樣品 | 制備時(shí)間 | ~30 min (24個(gè)樣品) |
離心機(jī) | 臺(tái)式離心機(jī) | 樣本酶解物分離 | 離心分離 |
離心柱液體盛裝量 | 800 μL | 純化柱DNA承載量 | 80 μg |
洗脫體積 | 100-200 μL | 植物樣本處理量 | 100 mg |
操作流程
說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品文獻(xiàn)
A simple and cost-effective method for screening of CRISPR/Cas9-induced homozygous/biallelic mutants
Jinggong Guo, Kun Li, Lifeng Jin, Rui Xu, Kaiting Miao, Fengbo Yang,Chaoya Qi, Lin Zhang, Jose R.Botella, Ran Wang, Yuchen Miao
河南大學(xué)植物脅迫生物學(xué)研究所生物系棉花生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室
Plant Methods ( IF 4.269 ) Pub Date : 2018-05-29, DOI：10.1186/s13007-018-0305-8
文章鏈接：https://plantmethods.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13007-018-0305-8
DNA barcoding analysis and phylogenetic relationships of tree species in tropical cloud forests
Yong Kang, Zhiyan Deng, Runguo Zang & Wenxing Long
海南熱帶生物資源可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室Scientific Reports ( IF 4.259 ) Pub Date : 2017-10-02, DOI：10.1038/s41598-017-13057-0
文章鏈接：https://www.nature.com/articles/s41598-017-13057-0
Complete Chloroplast Genome Sequence of Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg and Evolution Analysis within the Malvales Order
Ying Wang, Di-Feng Zhan, Xian Jia, Wen-Li Mei, Hao-Fu Dai, Xiong-Ting Chen* and Shi-Qing Peng
中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物科學(xué)與生物技術(shù)研究所
農(nóng)業(yè)部熱帶作物生物學(xué)與遺傳資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室
Frontiers in Plant Science ( IF 4.495 ) Pub Date : 2016-03-08, DOI：10.3389/fpls.2016.00280
文章鏈接：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4781844/
MSDS
COA
提取過(guò)程中無(wú)法獲得基因組DNA
Answer
通常有多種因素會(huì)影響基因組DNA產(chǎn)量，包括樣本來(lái)源、樣本新老程度、樣本保存條件、操作等。
1. 組織樣本保存不當(dāng)或保存時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致基因組DNA已經(jīng)降解。
建議：組織樣本保存于液氮或者-20℃；盡量使用新近采集樣本進(jìn)行基因組DNA的提取。
2. 樣本用量過(guò)少可能導(dǎo)致提取不到相應(yīng)的基因組DNA。
建議：對(duì)于保存時(shí)間很長(zhǎng)或基因組DNA降解比較厲害的組織樣本，可以適當(dāng)增加組織樣本的用量，以便提取獲得可觀的基因組DNA?？梢愿鶕?jù)DNA需要確定樣本的用量，但是新鮮樣本不宜超過(guò)100mg，干燥樣本不宜超過(guò)30mg。
3. 樣本沒(méi)有進(jìn)行液氮研磨或液氮之后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
建議：在進(jìn)行DNA提取時(shí)，樣本需進(jìn)行液氮充分研磨以破碎細(xì)胞壁；研磨完成后請(qǐng)盡快將樣本粉末轉(zhuǎn)移至65℃預(yù)熱的Buffer PL1中(一旦研磨的粉末融化，基因組DNA便開(kāi)始快速降解)。
4. Foregene Protease保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease保存條件或者更換新的Foregene Protease進(jìn)行酶解反應(yīng)。
5. 試劑盒保存不當(dāng)或存放時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致試劑盒里面某些組分失效。
建議：購(gòu)置新的植物基因組DNA提取試劑盒進(jìn)行相關(guān)操作。
6. 試劑盒使用不當(dāng)。
建議：購(gòu)置樣本專用的植物基因組DNA提取試劑盒(Plant DNA Isolation Kit)進(jìn)行植物基因組DNA的提取純化。
7. Buffer WB沒(méi)有添加無(wú)水乙醇。
建議：確認(rèn)Buffer WB中添加正確體積的無(wú)水乙醇。
8. 洗脫液沒(méi)有正確滴加到硅膠膜上。
建議：將65℃預(yù)熱的洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
提取獲得低產(chǎn)量基因組DNA
Answer
1. 樣本保存不當(dāng)或保存時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致基因組DNA降解。
建議：組織樣本保存于-20℃；盡量使用新近采集組織樣本進(jìn)行基因組DNA的提取。
2. 組織樣本用量過(guò)少，提取到的基因組DNA含量會(huì)較少。
建議：有些植物樣本含水量豐富，比如：水生植物如藻類等，可以適當(dāng)增加其用量或?qū)⑵渖晕⑹笤龠M(jìn)行操作。
3. 樣本液氮研磨不徹底或者研磨完成后在室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
建議：液氮研磨一定要充分，盡量破碎樣本細(xì)胞壁；研磨完成后立即將樣本粉末轉(zhuǎn)移至65℃預(yù)熱的Buffer PL1中進(jìn)行下一步操作。
4. 沒(méi)有使用正確的試劑盒。
建議：使用專用的植物基因組DNA提取試劑盒(Plant DNA Isolation Kit)進(jìn)行植物基因組DNA的提取純化。
5. ForegeneProtease保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease保存條件或者更換新的Foregene Protease進(jìn)行酶解反應(yīng)。
6. 洗脫液?jiǎn)栴}
建議：請(qǐng)使用Buffer EB進(jìn)行洗脫；如果使用ddH2O或其他洗脫液，確認(rèn)洗脫液的pH值在7.0-8.5之間。
7. 洗脫液沒(méi)有正確滴加
建議：請(qǐng)將洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
8. 洗脫液體積太少
建議：請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)上要求使用洗脫液進(jìn)行基因組DNA洗脫，最少不要低于100μL。
提取獲得基因組DNA純度低
Answer
基因組DNA純度低會(huì)導(dǎo)致下游實(shí)驗(yàn)的失敗或效果差，如：酶切不開(kāi)，PCR得不到目的基因片段等。
1. 雜蛋白污染、RNA污染。
分析：沒(méi)有使用Buffer PW洗滌純化柱；Buffer PW洗滌純化柱沒(méi)有使用正確的離心轉(zhuǎn)速。
建議：在上清液過(guò)柱時(shí)盡量保證上清液中無(wú)沉淀；務(wù)必按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
2. 雜質(zhì)離子污染。
分析：省略了Buffer WB洗滌純化柱或者只洗滌了一次，導(dǎo)致殘留的離子污染。
建議：務(wù)必按說(shuō)明書(shū)使用Buffer WB洗滌2次，以盡量去除殘留的離子。
3. RNA酶污染。
分析：Buffer中添加了外源的RNA酶；Buffer PW洗滌操作不正確，導(dǎo)致RNA酶殘留，影響下游RNA實(shí)驗(yàn)操作，如：體外轉(zhuǎn)錄等。
建議：Foregene系列核酸提取試劑盒無(wú)需額外添加RNA酶即可去除RNA，Plant DNA Isolation Kit里面所有試劑均無(wú)需添加RNA酶；務(wù)必按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
4. 乙醇?xì)埩簟?/span>
分析：Buffer WB洗滌純化柱后，沒(méi)有進(jìn)行空管離心操作。
建議：按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行正確的空管離心操作。
