無RNA酶污染：試劑盒提供的DNA-Only Column使得實驗過程中無需額外添加RNA酶即可去除基因組DNA中的RNA，避免實驗室遭受外源RNA酶污染。
速度快：Foregene Protease Plus具有比同類蛋白酶更高的活性，搭配Buffer TL1酶解緩沖液可以在45分鐘內(nèi)完全酶解鼠尾組織，無需4℃過夜處理；操作簡單，基因組DNA提取操作在90分鐘內(nèi)即可完成。
方 便：離心操作均在常溫，無需4℃低溫離心或乙醇沉淀DNA。
安 全：無需有機(jī)試劑抽提。
質(zhì)量高：提取獲得的基因組DNA片段大、無RNA、無RNA酶、離子含量極低，能滿足各種實驗的要求。
產(chǎn) 品 名 稱 | 鼠尾基因組DNA提取試劑盒 Mouse Tail DNA Mini Kit |
貨 號 | DE-05211 |
規(guī) 格 | 50T |
價 格 | ￥712.00 |
描 述 | 提取鼠尾基因組DNA最快的試劑盒，1小時能從鼠尾中提取到高質(zhì)量的基因組DNA。 |
產(chǎn)品介紹
由于鼠尾自身的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，提取鼠尾基因組DNA一直以來都困擾著研究人員：一是鼠尾處理時間長，基因組DNA易降解；二是處理困難，提取的基因組DNA純度低。
本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的DNA-Only Column、全新的Foregene Protease以及獨特的緩沖液體系，可以在45min內(nèi)消化鼠尾樣品，從而最大程度上避免了基因組DNA的降解，縮短了樣本處理時間。試劑盒可以在60-90min內(nèi)從0.5-1cm幼年或成年小鼠鼠尾中提取到10-20μg高質(zhì)量、高純度基因組DNA。
離心柱中采用的DNA-only硅膠基質(zhì)材料為本公司特有的新型材料，能高效、特異的吸附DNA，對DNA的最大吸附量為80μg，獨特的緩沖、洗脫體系可最大限度的去除RNA、雜質(zhì)蛋白、離子及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取得到的基因組DNA片段大、純度高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠，DNA片段大小穩(wěn)定在23kb左右。
也可以使用該試劑盒提取出鼠尾外的鼠其他組織，包括鼠耳、鼠肌肉、鼠肝臟等組織，做到一試劑盒多用，滿足用戶進(jìn)行不同的實驗需要。
試劑盒應(yīng)用
該試劑盒適用于新鮮或凍存的大、小鼠鼠尾(也可以用于純化小鼠或大鼠肌肉、鼠耳基因組DNA)基因組DNA提取純化。
純化DNA的應(yīng)用
鼠尾基因組DNA提取試劑盒純化獲得的基因組DNA純度高，可用于常規(guī)分子生物學(xué)操作，如：酶切、PCR、Southern雜交、文庫構(gòu)建等實驗。
DNA提取得率和純度
鼠尾基因組DNA的產(chǎn)量與樣本大小、保存條件、酶解程度以及操作有關(guān)，鼠尾基因組DNA提取試劑盒提供了一種有效、快速獲得鼠尾基因組DNA的手段。獲得基因組DNA純度高，降解少，其OD260/280=1.7-1.9。
試劑盒內(nèi)容
Buffer TL1：提供鼠尾酶解環(huán)境。
Foregene Protease Plus：在Buffer TL1的環(huán)境下酶解組織樣本。
Buffer TL2：失活Foregene Protease Plus，并提供DNA上柱環(huán)境。
Buffer PW：去除DNA中的蛋白質(zhì)、RNA等雜質(zhì)。
Buffer WB：去除DNA中的殘留的鹽離子。
Buffer EB：洗脫純化柱膜上的DNA。
DNA-only Column：特異吸附裂解產(chǎn)物中的基因組DNA。
產(chǎn)品信息
型號 | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個樣品 | 制備時間 | 60-90 min (24個樣品) |
離心機(jī) | 臺式離心機(jī) | 組織酶解物分離 | 離心分離 |
離心柱液體盛裝量 | 800 μL | 純化柱DNA承載量 | 80 μg |
洗脫體積 | 100-200 μL | 鼠尾樣本處理量 | 0.5-1 cm |
操作流程
說明書
產(chǎn)品文獻(xiàn)
Conditional Knockout of Src Homology 2 Domain-containing Protein Tyrosine Phosphatase-2 in Myeloid Cells Attenuates Renal Fibrosis after Unilateral Ureter Obstruction JingFei Teng, Kai Wang , Yao Li , FaJun Qu , Qing Yuan , XinGang Cui , QuanXing Wang , DanFeng Xu
第二軍醫(yī)大學(xué)上海長征醫(yī)院泌尿外科
Chinese Medical Journal ( IF 1.016 ) Pub Date : 2015-05-05, DOI：10.4103/0366-6999.156121
文章鏈接：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4831547/
MSDS
COA
提取過程中無法獲得基因組DNA
Answer
通常有多種因素會影響鼠尾基因組DNA產(chǎn)量，包括鼠尾來源、樣本保存條件、酶解程度、操作等。
1. 組織樣本保存不當(dāng)或保存時間太長，導(dǎo)致基因組DNA已經(jīng)降解。
建議：組織樣本保存于液氮或者-80℃；盡量用剛剪取的鼠尾樣本進(jìn)行基因組DNA的提取。
2. 鼠尾沒有進(jìn)行剪碎處理。
建議：由于鼠尾自身結(jié)構(gòu)復(fù)雜，盡量將鼠尾剪短至1mm左右，這樣可以使酶解進(jìn)行的更徹底；對于老年小鼠鼠尾，可以適當(dāng)增加酶解時間。
3. Foregene Protease Plus保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease Plus保存條件或者更換新的Foregene Protease Plus進(jìn)行酶解反應(yīng)。
4. 試劑盒保存不當(dāng)或存放時間太長，導(dǎo)致試劑盒里面某些組分失效。
建議：購置新的通用型基因組DNA提取試劑盒進(jìn)行相關(guān)操作。
5. Buffer WB沒有添加無水乙醇。
建議：確認(rèn)Buffer WB中添加正確體積的無水乙醇。
6. 洗脫液沒有正確滴加到硅膠膜上。
建議：將洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置2分鐘增加洗脫效率。
提取獲得低產(chǎn)量基因組DNA
Answer
1. 樣本保存不當(dāng)或保存時間太長，導(dǎo)致基因組DNA降解。
建議：組織樣本保存于液氮或者-80℃；盡量采用新近采取組織樣本進(jìn)行基因組DNA的提取。
2. 鼠尾剪取太短，提取到的基因組DNA含量會較少。
建議：鼠尾用量建議為0.5-1cm，以便提取獲得可觀的基因組DNA。
3. 鼠尾沒有進(jìn)行剪碎處理。
建議：由于鼠尾自身結(jié)構(gòu)復(fù)雜，盡量將鼠尾剪短至1mm左右，這樣可以使酶解進(jìn)行的更徹底。
4. Foregene Protease Plus保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease plus保存條件或者更換新的ForegeneProtease plus進(jìn)行酶解反應(yīng)。
5. 鼠尾酶解時間太短。
建議：酶解時間不宜太短，應(yīng)大于30分鐘。65℃酶解1小時可以完全消化鼠尾組織，只剩骨骼和毛發(fā)。對于成年小鼠或老年小鼠可以適當(dāng)增加酶解時間，以便酶解更徹底。
6. 洗脫液問題。
建議：請使用Buffer EB進(jìn)行洗脫；如果使用ddH2O或其他洗脫液，確認(rèn)洗脫液的pH值在7-8.5之間。
7. 洗脫液沒有正確滴加。
建議：請將洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置2分鐘增加洗脫效率。
8. 洗脫液體積太少。
建議：請按說明書上要求使用洗脫液進(jìn)行基因組DNA洗脫，最少不要低于100μL。
提取獲得基因組DNA純度低
Answer
基因組DNA純度低會導(dǎo)致下游實驗的失敗或效果差，如：酶切不開，PCR得不到目的基因片段等。
1. 雜蛋白污染、RNA污染。
分析：沒有使用Buffer PW洗滌純化柱；Buffer PW洗滌純化柱沒有使用正確的離心轉(zhuǎn)速。
建議：在上清液過柱時盡量保證上清液中無沉淀；務(wù)必按說明書進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
2. 雜質(zhì)離子污染。
分析：省略了Buffer WB洗滌純化柱或者只洗滌了一次，導(dǎo)致殘留的離子污染。
建議：務(wù)必按說明書使用Buffer WB洗滌2次，以盡量去除殘留的離子。
3. RNA酶污染。
分析：Buffer中添加了外源的RNA酶；Buffer PW洗滌操作不正確，導(dǎo)致RNA酶殘留，影響下游RNA實驗操作，如：體外轉(zhuǎn)錄等。
建議：Foregene系列核酸提取試劑盒無需額外添加RNA酶即可去除RNA，Mouse Tail DNA Mini Kit里面所有試劑均無需添加RNA酶；務(wù)必按說明書進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
4. 乙醇?xì)埩簟?/span>
分析：Buffer WB洗滌純化柱后，沒有進(jìn)行空管離心操作。
建議：按說明書進(jìn)行正確的空管離心操作。
