無RNA酶污染：試劑盒提供的DNA-Only Column使得實(shí)驗(yàn)過程中無需額外添加RNA酶即可去除基因組DNA中的RNA，避免實(shí)驗(yàn)室遭受外源RNA酶污染。
速度快：Foregene Protease具有比同類蛋白酶更高的活性，消化組織樣本速度快；操作簡(jiǎn)單，基因組DNA提取操作在20-80分鐘內(nèi)即可完成。
方 便：離心操作均在常溫，無需4℃低溫離心或乙醇沉淀DNA。
安 全：無需有機(jī)試劑抽提。
質(zhì)量高：提取獲得的基因組DNA片段大、無RNA、無RNA酶、離子含量極低，能滿足各種實(shí)驗(yàn)的要求。
微量洗脫體系：可以提高基因組DNA濃度，便于下游檢測(cè)或?qū)嶒?yàn)。
| 產(chǎn) 品 名 稱 | 微量基因組DNA提取試劑盒 Genomic DNA micro Kit |
| 貨 號(hào) | DM-01011 |
| 規(guī) 格 | 50T |
| 價(jià) 格 | ￥557.00 |
| 描 述 | 快速?gòu)奈⒘繕颖局屑兓@得高質(zhì)量的基因組DNA。 |
產(chǎn)品介紹
本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的DNA-Only Column、全新的Foregene Protease以及獨(dú)特的緩沖液體系，可以在20-80分鐘內(nèi)高效從各種微量生物樣本中，例如：微量血液、細(xì)胞、動(dòng)物組織、干燥血跡、臨床棉簽、毛囊等，純化得到到較高濃度、高質(zhì)量的基因組DNA。
離心柱中采用的DNA-Only硅膠膜為本公司特有新型材料，高效、專一吸附DNA，可最大限度的去除RNA、雜質(zhì)蛋白、離子及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。專門設(shè)計(jì)的微小純化柱結(jié)合基因組DNA，可用微量(15μL)洗脫液洗脫DNA，提高獲得的基因組DNA的濃度，便于下游檢測(cè)或?qū)嶒?yàn)。
試劑盒應(yīng)用
該試劑盒適用于純化以下樣本基因組DNA：新鮮或凍存的動(dòng)物組織、新鮮或抗凝凍存的微量全血、干血斑、培養(yǎng)的細(xì)胞、微量切片組織、毛囊、漱口水等。
純化DNA的應(yīng)用
微量基因組DNA提取試劑盒純化獲得的基因組DNA純度高，可用于常規(guī)分子生物學(xué)操作，如：酶切、PCR、Southern雜交、文庫(kù)構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。
DNA提取得率和純度
動(dòng)物組織基因組DNA提取得率與組織的來源、保存條件、保存時(shí)間、用量等因素相關(guān)，所得基因組DNA純度均滿足常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作，其OD260/280在1.7-1.9之間。
試劑盒內(nèi)容
Buffer ST1：提供樣本酶解環(huán)境。
Foregene Protease：在Buffer ST1的環(huán)境下酶解組織樣本。
Buffer ST2：失活Foregene Protease，并提供DNA上柱環(huán)境。
Buffer PW：去除DNA中的蛋白質(zhì)、RNA等雜質(zhì)。
Buffer WB：去除DNA中的殘留的鹽離子。
Buffer EB：洗脫純化柱膜上的DNA。
DNA-only Column：特異吸附裂解產(chǎn)物中的基因組DNA。
產(chǎn)品信息
型號(hào) | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個(gè)樣品 | 制備時(shí)間 | 20-80 min(24個(gè)樣本) |
離心機(jī) | 臺(tái)式離心機(jī) | 組織酶解物分離 | 離心分離 |
| 純化柱DNA承載量 | 40 μg | 離心柱液體盛裝量 | 800 μL |
洗脫體積 | 15-100 μL | 組織樣本處理量 | 5mg組織或微量樣本 |
操作流程
說明書
產(chǎn)品文獻(xiàn)
MSDS
COA
取過程中無法獲得基因組DNA
Answer
通常有多種因素會(huì)影響基因組DNA產(chǎn)量，包括樣本來源、樣本保存條件、樣本的預(yù)處理、操作等。
1. 組織樣本保存不當(dāng)或保存時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致基因組DNA已經(jīng)降解。
建議：組織樣本保存于液氮或者-80℃；用甲醛等溶液固定組織時(shí)應(yīng)盡量縮短從樣品采集到置于固定液之間的時(shí)間；盡量使用新近采集組織樣本進(jìn)行基因組DNA的提取。
2. 組織用量過少可能導(dǎo)致提取不到相應(yīng)的基因組DNA。
建議：對(duì)于保存時(shí)間很長(zhǎng)或基因組DNA降解比較厲害的組織樣本，可以適當(dāng)增加組織樣本的用量，以便提取獲得可觀的基因組DNA。可以根據(jù)DNA需要確定樣本的用量，但是不宜超過10mg。
3. Foregene Protease保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease保存條件或者更換新的Foregene Protease進(jìn)行酶解反應(yīng)。
4. 試劑盒保存不當(dāng)或存放時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致試劑盒里面某些組分失效。
建議：購(gòu)置新的通用型基因組DNA提取試劑盒進(jìn)行相關(guān)操作。
5. 試劑盒使用不當(dāng)。
建議：請(qǐng)確認(rèn)使用的試劑盒為Genomic DNA Micro Kit。
6. Buffer WB沒有添加無水乙醇。
建議：確認(rèn)Buffer WB中添加正確體積的無水乙醇。
7. 洗脫液沒有正確滴加到硅膠膜上。
建議：將65℃預(yù)熱的洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
提取獲得低產(chǎn)量基因組DNA
Answer
1. 樣本保存不當(dāng)或保存時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致基因組DNA降解。
建議：組織樣本保存于液氮或者-80℃；用甲醛等溶液固定組織時(shí)應(yīng)盡量縮短從樣品采集到置于固定液之間的時(shí)間；盡量使用新近采集組織樣本進(jìn)行基因組DNA的提取。
2. 組織樣本用量過少，提取到的基因組DNA含量會(huì)較少。
建議：對(duì)于保存時(shí)間過長(zhǎng)或基因組DNA降解比較厲害的組織樣本，可以適當(dāng)增加組織樣本的用量，以便提取獲得可觀的基因組DNA?？梢愿鶕?jù)DNA需要確定樣本的用量，但是不宜超過10mg。
3. Foregene Protease保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease保存條件或者更換新的Foregene Protease進(jìn)行酶解反應(yīng)。
4. 洗脫液?jiǎn)栴}。
建議：請(qǐng)使用Buffer EB進(jìn)行洗脫；如果使用ddH2O或其他洗脫液，確認(rèn)洗脫液的pH值在7.0-8.5之間。
5. 洗脫液沒有正確滴加。
建議：請(qǐng)將洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
6. 洗脫液體積太少。
建議：請(qǐng)按說明書上要求使用洗脫液進(jìn)行基因組DNA洗脫，最少不要低于15μL。
提取獲得基因組DNA純度低
Answer
基因組DNA純度低會(huì)導(dǎo)致下游實(shí)驗(yàn)的失敗或效果不理想，如：酶切不開，PCR得不到目的基因片段等。
1. 雜蛋白污染、RNA污染。
分析：沒有使用Buffer PW洗滌純化柱；Buffer PW洗滌純化柱沒有使用正確的離心轉(zhuǎn)速。
建議：在上清液過柱時(shí)盡量保證上清液中無沉淀；務(wù)必按說明書進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
2. 雜質(zhì)離子污染。
分析：省略了Buffer WB洗滌純化柱或者只洗滌了一次，導(dǎo)致殘留的離子污染。
建議：務(wù)必按說明書使用Buffer WB洗滌2次，以盡量去除殘留的離子。
3. RNA酶污染。
分析：Buffer中添加了外源的RNA酶；Buffer PW洗滌操作不正確，導(dǎo)致RNA酶殘留，影響下游RNA實(shí)驗(yàn)操作，如：體外轉(zhuǎn)錄等。
建議：Foregene系列核酸提取試劑盒無需額外添加RNA酶即可去除RNA，Genomic DNA Micro Kit里面所有試劑均無需添加RNA酶；務(wù)必按說明書進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
4. 乙醇?xì)埩簟?/span>
分析：Buffer WB洗滌純化柱后，沒有進(jìn)行空管離心操作。
建議：按說明書進(jìn)行正確的空管離心操作。
5. 其他雜質(zhì)污染。
分析：保存樣本或特殊樣本沒有進(jìn)行預(yù)處理。
建議：按操作說明對(duì)樣本進(jìn)行徹底的預(yù)處理。
